疾病的實驗探究已逐漸深入到細胞和基因水平中;在疾病的實驗探究過程中,單細胞懸液制備尤為重要,它可助力于對單個細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能及基因表達等的深入了解,揭示生命活動分子機制。
那對于類器官培養(yǎng)前處理-肺該如何進行單細胞懸液制備呢?
實驗案例:
1.實驗?zāi)康模喝嶒炇夷P托∈蠓谓M織制備單細胞懸液,進行類器官培養(yǎng),展開藥物篩選研究。
2.實驗樣品:模型小鼠一只
3.實驗耗材:消化酶、終止液、移液槍槍頭、臺盼藍染料
4.實驗設(shè)備:單細胞懸液制備儀JX-CKSM-6WK
小鼠肺組織單細胞懸液制備的實驗步驟:
1.打開儀器電源,點擊管架加熱和模塊加熱;消化酶和終止液冷水解凍
2.小鼠呼吸麻醉后,解剖取出肺組織,預(yù)冷PBS沖洗血水
3.用眼科剪剪取組織樣本,放置于加滿消化液的消化管
4.先放置于管架中預(yù)熱幾分鐘,然后轉(zhuǎn)移至運行模塊中,關(guān)閉儀器蓋子,選擇對應(yīng)程序,運行結(jié)束,取出消化管
5.組織塊消化成渾濁的細胞懸液,用70μm的濾網(wǎng)過濾細胞,加入終止液終止消化,離心,重懸,后續(xù)可進行類器官培養(yǎng)
實驗圖片:
小鼠肺組織單細胞懸液制備的實驗結(jié)果:
用臺盼藍染色,上細胞計數(shù)儀進行得率和活率的分析
肺組織單細胞懸液的活率為93%
單細胞懸液制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代單細胞細胞懸液制備設(shè)備,應(yīng)用于流式細胞術(shù)/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗,具有起始組織量小,時間短,細胞得率高,細胞活性高的特點。采用國際DIN方法設(shè)計,低噪音,使用方便,性能穩(wěn)定,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。