實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>此次實(shí)驗(yàn)室樣品為小鼠肺組織,通過(guò)實(shí)驗(yàn)前處理制備儀器對(duì)肺組織樣品單細(xì)胞懸液的制備,為便于后續(xù)更詳細(xì)的了解生物樣品的基因表達(dá)、蛋白質(zhì)水平、代謝狀態(tài)等信息。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:單細(xì)胞懸液制備儀 JX-CKSM-12WK
小鼠肺組織樣品的前處理實(shí)驗(yàn)研磨過(guò)程:
1.選取健康小鼠1只,斷頸處死,打開(kāi)腹腔,取出肺器官
2.用1XPBS洗滌肺器官
3.選取28.5mg肺組織,用眼科剪剪成糊狀
4.放入加滿(mǎn)消化液的離心管中
5.放入單細(xì)胞懸液制備儀的管架上,管架預(yù)熱5分鐘
6.選擇模塊4進(jìn)行實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)束后儀器自動(dòng)停止
7.用70um濾網(wǎng)過(guò)濾,加入終止液終止消化
8.放到離心機(jī)上重懸,棄掉上清,加入少量PBS打散混勻底部沉淀細(xì)胞
9.吸取200ul單細(xì)胞懸液,加入PI避光染色10分鐘。進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1. 機(jī)器使用時(shí)應(yīng)保證位置放置平穩(wěn)。
2. 機(jī)器適合短時(shí)、間歇工作,請(qǐng)勿長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)使用,工作時(shí)間建議不超過(guò) 8 小時(shí)?! ?/p>
3. 為保護(hù)機(jī)器內(nèi)部的電路和機(jī)械,禁止用流水沖洗,而只能用濕布擦拭。
4. 使用過(guò)程中如有任何異常,應(yīng)立即斷電,交由專(zhuān)業(yè)人員處理?! ?/p>
5. 機(jī)器必須放置在平整的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上(最好是石質(zhì)臺(tái)面),以防設(shè)備工作時(shí)振動(dòng)?!?/p>
6. 一定要時(shí)刻保持警惕狀態(tài),請(qǐng)一切檢查好之后再開(kāi)啟動(dòng)。
小鼠肺組織樣品的前處理實(shí)驗(yàn)研磨前后效果圖:
單細(xì)胞懸液制備儀對(duì)小鼠肺組織樣品的前處理實(shí)驗(yàn)制備效果很好,細(xì)胞活率達(dá)到98.67%;通過(guò)制備小鼠肺組織樣品的單細(xì)胞懸液,可以將樣品肺組織中的細(xì)胞分散為單個(gè)細(xì)胞,并保持其完整的細(xì)胞膜和細(xì)胞器結(jié)構(gòu);通過(guò)單細(xì)胞懸液的制備,可以助力實(shí)驗(yàn)研究人員對(duì)每個(gè)單細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析,更詳細(xì)的了解其樣品組織的基因表達(dá)、蛋白質(zhì)水平、代謝狀態(tài)等信息。
單細(xì)胞制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細(xì)胞懸液制備設(shè)備,應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測(cè)序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實(shí)驗(yàn),具有起始組織量小,時(shí)間短,細(xì)胞得率高,細(xì)胞活性高的特點(diǎn);對(duì)不同組織的制備均可達(dá)到90%以上的活率。