在對(duì)生物細(xì)胞的測(cè)序?qū)嶒?yàn)中，如何獲得高質(zhì)量的單細(xì)胞懸浮液是成功的關(guān)鍵，但復(fù)雜多樣的組織類(lèi)型卻會(huì)給懸浮液的制備帶來(lái)挑戰(zhàn)。那這該如何從細(xì)胞組織樣本中獲得高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液呢？
單細(xì)胞懸液制備儀測(cè)序技術(shù)可以在生物細(xì)胞層面進(jìn)行高分辨率的實(shí)驗(yàn)分析，進(jìn)而可揭示單細(xì)胞的狀態(tài)和功能，避免了由傳統(tǒng)基因組技術(shù)平均信號(hào)產(chǎn)生的結(jié)果誤差；被廣泛應(yīng)用于腫瘤、發(fā)育、免疫、神經(jīng)科學(xué)、干細(xì)胞分化、大規(guī)模細(xì)胞圖譜構(gòu)建等行業(yè)研究領(lǐng)域。
為了確保后續(xù)的單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行，因此需要嚴(yán)格的質(zhì)量去控制細(xì)胞懸液的制備；為了確保細(xì)胞樣品的活性，建議使用新鮮的細(xì)胞組織去制備細(xì)胞懸液。若是不能在取樣后直接進(jìn)行測(cè)試，可將組織樣本保存在4℃環(huán)境下的組織保存液中，在48小時(shí)內(nèi)對(duì)其進(jìn)行懸液消化。
在解離前可將組織剪切成碎塊，可增加酶與組織的接觸面積；在切割組織時(shí)，可以加入少量百分之10的細(xì)胞培養(yǎng)基，可避免組織細(xì)胞脫水。酶消化法主要是利用酶來(lái)去除細(xì)胞間質(zhì)，可使細(xì)胞脫落分散；由于不同組織的細(xì)胞間質(zhì)不同，所以需要選擇特定的酶和特定的消化時(shí)間。
在獲得單細(xì)胞懸浮液后，可根據(jù)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)對(duì)細(xì)胞的活性、結(jié)團(tuán)率、濃度、直徑分布等參數(shù)進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)；如果這些參數(shù)的檢驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有達(dá)到預(yù)期，那對(duì)懸浮液的質(zhì)量應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行優(yōu)化。
若細(xì)胞活性較低，可通過(guò)去除死細(xì)胞來(lái)提高懸浮液的細(xì)胞活性；對(duì)于細(xì)胞的結(jié)團(tuán)率高是因?yàn)榻M織沒(méi)有完全消化或細(xì)胞釋放DNA，因此需要根據(jù)不同情況去調(diào)整消化條件、DNA優(yōu)化酶處理等措施。
綜上便是對(duì)有關(guān)生物細(xì)胞制備高質(zhì)量的單細(xì)胞懸浮液的操作應(yīng)用簡(jiǎn)述，具體情況還需要根據(jù)實(shí)際實(shí)驗(yàn)狀況進(jìn)行分析。
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